【结果】:①PTCH基因在正常组织、肠上皮化生组织、不典型增生组织、胃癌组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.05)且呈递增趋势。在正常组织中不表达;在肠上皮化生组织中PTCH蛋白阳性表达2例(10%),染色强度均为(+),PTCHmRNA的相对表达量是0.07±0.04;在不典型增生组织中P和TCH蛋白阳性表达6例(40%),其中染色强度(+)2例,染色强度(++)4例,PTCHmRNA的相对表达量是0.18±0.10;在胃癌组织中PTCH阳性表达33例(78.6%),其中染色强度(+++)以上19例,PTCHmRNA的相对表达量是0.62±0.11。②胃还有癌组织中PTCH蛋白的表达与胃癌的分化程度、TNM分期、临床分期密切相关(P＜0.05)。 【结论】:①PTCH与胃癌的分化程度,侵袭,临床分期有关,其表达对判断预后有一定价值。②PTCH可能参与了胃癌的发生
目的:RNA干扰(RNA interference, R购买SaracatinibNAi)多药耐药胃癌细胞7901/VCR多药耐药基因(Multidrug resistance gene, MDR1)转录和蛋白表达,并探讨pshRNA-MDR1对胃癌7901/VCR细胞裸鼠皮下移植瘤内MDR1表达的抑制作用,同时进一步探讨pshRNA-MDR1联合TRAIL基因对胃癌7901/VCR细胞生长的抑制作用,为肿瘤的基因治疗奠定基础。

研究结果： 1)通过台盼兰拒染法结合血细胞计数板计数,显示Dasatinib能显著抑制HL60细胞的增殖,并且呈现一定的浓度依赖性和时间依赖性。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,并用western blot法检测凋亡相关蛋白表达水平,结果显示,高浓度Dasatinib均能引起HL60细胞(30μM)和NB4(20μM)细胞的凋亡。流式细胞术分析细胞周期情况,显示Dasa还有tinib能使HL60细胞和NB4细胞的细胞周期阻滞在G1/G0期。人白血病裸小鼠移植瘤模型评价Dasatinib的体内药效,结果显示,Dasatinib对AML细胞的体内增殖具有较好的抑制作用。 2)检测细胞分化表面抗原标记物CDllb的表达,结果显示Dasatinib能够诱导HL60和NB4细胞发生分化,且呈时间和浓度依赖性关系,Dasa可能tinib (10μM作用HL60细胞72小时后,CD11b阳性率为48%,Dasatinib (5μM)作用NB4细胞48小时后,CD11b阳性率达到了49%。瑞氏-吉姆萨的染色结果表明Dasatinib作用72小时后,HL60细胞和NB4细胞发生了髓系细胞方向的分化。NBT还原实验结果确证了Dasatinib诱导HL60细胞分化的能力。R并且eal-time PCR以及western blot实验结果进一步证实了Dasatinib可以激活AML细胞中髓性分化相关因子的转录。以上这些实验结果都表明Dasatinib可以诱导AML细胞发生髓性分化。 3) Western blot结果表明Dasatinib作用后AML细胞中RARa的蛋白表达水平随时间进程明显下降。采用荧光素酶报告基因系统检测RARa荧光素酶活性,显示Dasatinib并不能激活RARa的转录。

缺少与临床密切相关的动物模型是阻碍靶向药物发展的重要因素之一。小鼠体外细胞成瘤模型数十年来一直被用作临床前抗肿瘤药物研究的标准工具,但是药物进入临床试验后的高失败率让我们开始怀疑这个传统的成瘤模型对药物的预测能力。经过长期的体外培养及筛选的细胞移植成瘤后,通常已经丢失了来源肿瘤组织的分子特征和肿瘤异质性,这也是其对临床药物反应预测能力较差的原因。相比较体外细胞成瘤模型,病人组织来selleck激酶抑制剂源肿瘤裸鼠移植瘤模型(patient derived tumor xenograft, PDTX)能很好的保持来源病人肿瘤组织在组织病理、遗传及表型方面的特征,因而能较好的预测药物的反应性。近年来,大量PDTX模型在各种肿瘤中被建立起来,包括肺癌、结直肠癌、乳腺癌、胰腺癌及胃癌等。PDTX模型目前逐渐成为研究肿瘤生物学及评价抗肿瘤药物的有效工具。 曲妥珠PD0325901体外单抗被批准用于治疗生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2, HER2)阳性的胃癌开启了胃癌靶向治疗的时代。其后至今却只有雷莫芦单抗(ramucirumab)和阿帕替尼(apatinib)两个抗血管药物被批准用于晚期胃癌的二线治疗,但是目前胃癌靶向治疗对总生存率的提高仍然是有限的。因此研发新的药物,MK-2206数据表尤其是靶向药物,对胃癌治疗尤为重要。近年来,较多的研究集中在了受体络氨酸家族(RTK)成员上,这其中就包括了肝细胞生长因子受体(cMet)、成纤维细胞生长因子受体2(Gbroblast growth factor receptor2, FGFR2)、表皮生长因子受体(EGFR)等。目前许多研究正在探索相关通路抑制剂在胃癌中的抗肿瘤作用。胃癌PDTX模型可以作为筛选这些潜在靶向药物的理想平台,从而为进一步的临床试验提供可靠的数据支持。

手术结合放化疗是目前宫颈癌的综合治疗模式,但对于晚期患者已失去手术机会,而放化疗对机体正常组织的损伤使一些患者无法耐受。基因治疗可同时阻断多个癌基因的表达,效果显著,且具有许多传统方法无法比拟的特点和优势,可作为手术和放化疗的补充,为宫颈癌的治疗开辟了一条新的途径。叉头框蛋白(forkhead box prLY294002 花费otein,FOX)是一类转录因子,共分为19个亚家族,分别被命名为FOXA~S,其中O亚家族(FOXO)是研究最为深入的一类。人FOXO亚家族有4个成员,即FOXO1、FOXO3、FOXO4和FOXO6,其中FOXO1蛋白广泛表达于几乎所有组织,调控着细胞调亡及抗氧化应激等过程,而且是一种重要的肿瘤抑制因子。有研究表明,微RNA(micro RNA,mi RNA)作为一种转录后调节因子,可调控FOXO1基因的表达,参与细胞分化、增殖、凋亡等诸多生物学过程,提示mi RNA可能作为癌基因或抑癌基因在肿瘤的发生发展中起重要作用。mi RNA是高等真核生物中的一类长Epigenetics抑制剂约20~23个核苷酸的小分子单链RNA,大量研究证实,肿瘤组织和正常组织中的mi RNA表达谱存在显著差异。micro RNA-135b(mi R-135b)最早发现于鼠,随后被证实在脊椎动物中广泛存在。mi R-135b编码基因为MIRN135B,定位于1q32.1,其前体由70个核苷酸组成,在胞质中经Dicer酶剪切生成长约21~24个核苷酸的成熟序列。

采用HDACs试剂盒对所有目标化合物进行初步活性筛选,结果显示多数噻二唑类异羟肟酸衍生物对HDACs有较好的抑制作用,其中化合物6i、6d、6j、6n、6m、6o和6k抑制HDACs的活性与SAHA相当,IC50值均在0.5μM以下。上述结果说明,1,3,4-噻二唑基团与异羟肟酸基团之间有5或6个亚甲基时抑酶活性较高。对于抑酶活性较高的噻所以二唑类化合物6i、6d、6j和6n又进行了抗肿瘤细胞增殖活性测试,初步研究发现这四个化合物对高表达HDACs的人MDA-MB-231乳腺癌细胞系和人K562慢性粒细胞白血病细胞系均具有抗增殖活性。
帕比司他是Novartis公司研制的异羟肟酸类小分子组蛋白去乙酰酶抑制剂,临床上作为罕见病用药,用于皮肤T细胞淋巴点击此处瘤的治疗。本文以苯肼和5-氯-2-戊酮为起始原料,经过缩合、分子内成环以及重排反应后得到关键中间体2-甲基色胺。以(E)-4-甲基肉桂酸甲酯为原料,经NBS溴化,得到另一中间体(E)-4-溴甲基肉桂酸甲酯。然后,2-甲基色胺与(E)-4-溴甲基肉桂酸甲酯发生N-烷基化反应,制得(E)-3-[4-[[2-(2-甲基NSC683864半抑制浓度-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙烯酸甲酯盐酸盐。最后,(E)-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙胺基]甲基]苯基]丙烯酸甲酯盐酸盐与过量的羟胺溶液发生胺解反应制得目标产物帕比司他,总收率30.6%。该工艺路线原料价廉易得,反应条件温和,有一定的应用价值。 2-(杂)芳甲基取代的苯并咪唑硫醚化合物骨架用于开发质子泵抑制剂类抗消化道溃疡药一直是药物化学家们的研究热点。

运用Real-time PCR、Western blot明确Pitx2的表达与Smad4表达的相关性。 结果 1BRCA2静默促进PanIN细胞生长、克隆增殖、迁移、侵袭及成瘤能力，但对细胞凋亡影响无显著性差异。 2表达谱芯片筛选，Real-time PCR及Western blot验证发现BRCA2静默后Wisp1,Ccna2, Cxcr4, Twist1, Ccn而且b2, Pitx2, Wisp2, Cdkn2a与Cdkn2b等基因显著差异表达。其中，在PanIN细胞中干扰Pitx2，促进PanIN细胞克隆增殖及侵袭；在PanIN-BR细胞中过表达Pitx2，可部分逆转PanIN-BR细胞已获得的克隆增殖及侵袭能力。 3Pitx2在正常胰腺、PanIN-I期以及PanIN-II期导管组织中呈阳性表达，在Cobimetinib体外PanIN-III期导管组织中表达减少，在胰腺癌组织中Pitx2表达明显减少；Pitx2阳性表达患者生存期高于阴性表达患者。同时，Pitx2过表达抑制人胰腺癌细胞克隆形成及侵袭能力。 4Pitx2甲基化水平在36例胰腺癌组织以及配对癌旁组织中非常低，Pitx2基因在胰腺癌组织中甲基化水平与其表达水平不具相关性。Pitx2过表达可逆转细胞由于SJQ1细胞系mad4静默或Tp53突变所获得的克隆形成及侵袭能力；且在人胰腺癌细胞中证实，Smad4基因可促进Pitx2基因的表达。 结论 BRCA2静默可单独促进PanIN细胞生物学功能恶性转化，Pitx2过表达除了可逆转细胞由于BRCA2静默所获得的恶性生物学行为，同样可逆转Smad4静默或Tp53突变所获得的恶性生物学行为。Pitx2在正常胰腺和癌前病变组织中表达高于其在胰腺癌组织中表达，Pitx2表达阴性提示患者预后不良。

在美国社会的各个种族中,非洲裔、亚洲裔以及西班牙裔美国人的胃癌发病率要高于白种人的胃癌发病率。在世界范围内,胃癌是第四大恶性肿瘤,其死亡率位居第二位。胃癌在东亚和南美洲发病率较高,但是近些年来,其发病率在发达国家呈逐年上升趋势,约占世界范围内胃癌新增病例数和死亡数的三分之二。而在美国,胃癌的发病率却在逐渐下降。在发达国家阵营中,日本和韩国的胃癌发病率则最高。胃癌在日本是最常见的恶性肿INK1197分子重量瘤。正因为如此,日本政府于上世纪七十年代启动了胃癌筛选计划,得益于该计划的实施,胃癌在日本的发病率下降了50%。尽管胃癌在日本的发病率在下降,但是其大部分都是末端胃癌。胃癌发病的危险因素主要是环境因素和基因遗传因素。1994年,国际癌症研究机构明确提出幽门螺杆菌是一种致癌物。大量的科学研究也证实胃癌发病与幽门螺杆菌感染有关。目前认为,幽门螺杆菌感染导致胃癌形Selleck Onalespib成的主要机制是感染导致胃粘膜产生慢性炎症,长期的感染导致胃炎,主要集中在胃体,并伴有胃粘膜的萎缩。在一些患者中,这一病变还可导致胃肠道粘膜发生化生、异型增生,直至最后发生肠型腺癌。研究表明,在胃肠道粘膜发生化生的过程中,大量的基因存在异常表达,最终可能导致胃肠道粘膜发生癌变,例如,环氧酶2、细胞周期素蛋白D2、p53在胃粘膜化生过程中过表达,微卫星不稳定性,selleck激酶抑制剂p27的表达降低以及CDX1、CDX2等转录因子在胃粘膜化生过程中的异常表达。这些均表明胃肠道粘膜化生是胃癌发病过程中的一个重要的危险因素。但是并不是每一个发生肠化生的患者都会发展成胃癌。研究表明,宿主炎症反应在这一过程中发挥重要作用。有文献报道,白介素1表达升高的患者发生胃癌的风险较大。此外,高盐食物,特别是一些含有大量的硝酸盐的腌制或者熏制的食物,再加上水果、蔬菜的摄入量较低,经常有这一饮食习惯的人群的发生胃癌的几率将会大大增加。

也有实验表明，NA对HSC有促进增值和抑制凋亡的作用。本课题组前期实验已在整体水平上证实，NA有促进HSC增殖的作用，非选择性α-AR拮抗药酚妥拉明（phentolamine, PTL）能够抑制HSC增殖。本实验在此基础上，希望能够筛选出高表达的肾上腺素受体亚型，观察NA对HSC的作用，以及NA是否通过特异性受体发挥作用，找到药物特异性的作用靶点，增加药效，降低副作用，并进一步更多对NA影响HSC的机制进行初步探讨。 目的： 探讨α1肾上腺素受体（α1-adrenoceptor subtypes, α1-AR）亚型在大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）中的表达情况，来明确在HSC-T6中优势表达的肾上腺素受体亚型。并探讨交感神经递质NA和α1B-,α1D-AR亚型拮抗药对HSC-T6激活、增殖和ECM分泌的影响，进一步探讨NA对HS而且C-T6作用的信号通路，来明确NA影响HSC-T6的可能机制。 方法： 1．体外培养HSC-T6，分为以下13组：（1）对照组，为HSC-T6组；（2） NA（10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9mol/L）组；（3）α1B-AR拮抗药氯乙基可乐定（Chloroethylclonidine Dihydrochloride, CECPD0325901研究购买10-5mol/L）组；（4）α1D-AR拮抗药BMY7378（10-5mol/L）组；（5）Gα抑制剂百日咳毒素（pertussis toxin, PT10-5mol/L）组；（6）蛋白激酶C（protein kinase C, PKC）抑制剂RO-32-0432（10-5mol/L）组；（7）磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）抑制剂LY294002（10-5mol/L）组；（8）AKT抑制剂GSK690693（10-5mol/L）组。

结论： 研究发现,Aurora-A过表达可促进肿瘤细胞增殖,细胞周期进展,软琼脂克隆形成,并可直接或者间接通过上调ATM表达,下调BRCA1/2表达,调节DNA损伤应答,促进肿瘤放化疗抵抗；相反的,Aurora-A沉默可抑制细胞增殖,细胞周期进展,软琼脂克隆形成,并可直接或者间接通过下调ATM表达,上调BRCAl/2表达,调节DNA损伤应答,促进JQ1溶解度肿瘤放化疗敏感。如此,Aurora-A可通过调节DNA损伤应答促进肿瘤放化疗抵抗,于是我们建议,在针对Aurora-A高表达的细胞系进行靶向治疗和研究时,DNA损伤应答相关的分子也应该被考虑在内。
目的：本文主要寻找新型Aurora激酶抑制剂(TZA系列)的抗肿瘤活性。通过计算机辅助药物设计的方法设计合成了一系列以吡唑buy Target Selective Inhibitor Library-氨基喹唑啉为母体的化合物,筛选其药理活性,从而寻找新型抗肿瘤先导化合物。 方法： 1.从RCSB Protein Data Bank选取Aurora A、Aurora B及其它丝氨酸／苏氨酸激酶晶体结构作为受体,通过Schrodinger9.0软件的分子对接功能与受试分子进行对接。选取已报道的Aurora A和B抑制剂那个Hesperadin、ZM447439、 MK0457、MLN8054、PHA-739358、AZD1152及其活性代谢产物AZD1152-HQPA作为阳性配体,选择无Aurora激酶抑制活性的hydrocortisone、captopril、clofibrate和aspirin作为阴性配体,通过分级评价结果初步判断受试分子与受体的特异性结合能力,探索受试分子可能的Aurora A和B抑制作用及选择性。

虽然小细胞肺癌对放化疗敏感性较高,但只有小部分患者可通过综合治疗获得长期生存。如何在SCLC治疗领域有所突破一直是研究者们面临的难题。纵观肿瘤治疗的发展历史,SCLCC恐怕是其中为数不多的一种几十年都没有重要进展的肿瘤。但人们始终没有停止对SCLC化疗新药、靶向治疗、免疫治疗等领域的积极探索。
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一、Aurora A抑制剂Aurora丝氨酸/苏氨酸激酶家族包括AurorDecitabine研究购买a A、B、和C,对调节细胞有丝分裂具有重要功能。其中,Aurora A激酶(AAK)位于有丝分裂细胞中心体和靠近纺锤体极端的纺锤体微管。AAK通过磷酸化多种底物影响细胞的有丝分裂,包括控制中心体的成熟,有丝分裂纺锤体的聚集等。干扰AAK导致有丝分裂纺锤体的缺陷,有丝分裂延迟和细胞死亡。一系列证据表明,AAK过表达与肿瘤形成
Aurora激酶是一种丝更多氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在肿瘤细胞的有丝分裂进程中起着重要的调控作用。因此,以该激酶为靶点,开发新型抗肿瘤药物,已成为研究热点。从提高化合物的活性和选择性、增加其水溶性及改善其药动学性质等方面,综述Aurora激酶抑制剂的结构优化策略。
Aurora激酶在肿瘤细胞的有丝分裂进程中起着重要的调控作用,从而影响细胞周期进程,是抗肿瘤药物的新靶点。本文就AuOSI-744购买rora激酶在肿瘤细胞生长中所起的作用及现阶段的Aurora激酶抑制剂进行系统介绍。
Ras相关蛋白Ral家族包括RalA和RalB,参与介导了多种细胞内外信号转导、跨膜运输、细胞形态的维持、转录因子的调节、细胞分化和肿瘤发生与转移等重要的生命活动。Ral家族上游信号通路以及广泛分布的效应器网络对其各种功能起着重要的调控作用,对Ral家族的深入研究将为预防和治疗肿瘤提供了一条新的途径。
复发与耐药是卵巢癌治疗失败的主要原因之一。