所有类型的胃癌组织均显示了较强的染色，与胃溃疡相比均有显著差异性。凝集素免疫组化结果与凝集素芯片结果一致。
6.在不同类型的胃癌组织中，与MPL特异结合的含有GalNAc的糖蛋白的表达量从高到低依次为：粘膜内癌、印戒细胞癌、腺癌、淋巴转移腺癌、未分化癌、类癌； NU7441制造商 7.在不同类型的胃癌组织中，与VVA特异性结合的GalNAc和GalNAcα-Ser/Thr（Tn）的糖蛋白的表达量从高到低依次为：粘膜内癌、印戒细胞癌、类癌、未分化癌、腺癌、淋巴转移腺癌； 8.凝集素芯片检测糖蛋白技术可为胃癌的早期诊断及治疗提供依据。
表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）对于多种细胞具有促进增殖和营养作用。EGFR在多种肿瘤细胞内高表达，说明其与这些肿瘤的发生、发展等变化有关。另外，大量研究表明EGFR信号系统与肿瘤的发生和肿瘤耐药性关系密切，并且EGFR的异常变化也是骨肉瘤的显著特点。蜂毒（Beevenom, BV）做为免疫相关疾病治疗制剂已广泛应用，特别是在肿瘤治疗领域其作用十分显著。研究发现，肾癌、肺癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌以及白血病细胞均可成为BV主要成分蜂毒肽（Melittin）的靶标。Melittin激活PLA2从而发挥细胞毒作用已被公认为BV抗肿瘤的主要作用机制。Melittin通过激活Caspase酶和基质金属蛋白酶，诱导多种肿瘤细胞发生凋亡，从而实现其抗肿瘤作用。现已证明，将Melittin与激素受体、特异性抗体等多种具有导向作用的物质融合表达，可以有效治疗多种肿瘤。本研究将Melittin通过柔性肽与抗EGFRscFv连接，并由大肠杆菌进行表达，制备了融合蛋白antiEGFR/MEL。对表达条件进行了优化，并进行了复性和初步纯化。利用表达的融合蛋白，针对人骨肉瘤细胞进行了体内、外抑瘤实验研究。研究结果表明，含有EGFR单链抗体的重组蛋白antiEGFR/MEL可与OS732细胞有效结合，并定位于OS732细胞膜表面。antiEGFR/MEL能够有效抑制OS732细胞的生长，但对正常细胞L02无明显作用。另外，antiEGFR/MEL抑制OS732细胞生长的现象，呈现明显的时间效应和剂量效应趋势。本研究还利用BALB/c小鼠结合小鼠骨肉瘤细胞S180，建立了实体肉瘤细胞模型，并开展了体内抑瘤实验研究。研究结果表明，antiEGFR/MEL可以抑制S180实体肿瘤生长、延长动物模型生存期、延长动物模型肿瘤倍增时间和肿瘤生长延迟时间。以上结果说明，antiEGFR/MEL具有应用于骨肉瘤生物治疗研究的潜质。
原发性肝癌在全世界恶性肿瘤发病率中占第五位,癌症相关死亡率中占第三位；而我国原发性肝癌的发病率和死亡率远高于其他国家,在恶性肿瘤发病率中占第三位,恶性肿瘤死因排位中占第二位。大部分肝癌患者发现时已为晚期,需要进行全身治疗,包括全身化疗和靶向治疗；然而全身化疗对肝癌患者的治疗效果并不理想,主要原因在于肿瘤细胞的耐药和患者不能耐受化疗的毒副反应。为了减轻化疗药物的毒副作用和增加药物的疗效,对药物进行分子修饰,使其能够在患者体内靶向作用于肿瘤组织是目前研究的一个方向。
目前用于原发性肝癌的化疗药物中,阿霉素(DOX)是最为常见药物之一,但大剂量的阿霉素治疗将给患者带来严重的毒副反应,如血液毒性、胃肠道反应、肝肾毒性,特别是对心脏的毒性。 Cathepsin 为什么 PF-02341066体外 B (Cat B)是位于溶酶体中的一种蛋白酶,在肿瘤细胞中常呈高表达,有促进肿瘤细胞侵袭和转移的作用。并且Cat B可特异酶解Phe-Lys二肽,在靶向抗肿瘤新药研发中,Cat B有望成为一个潜在的分子靶点。 为此,Dubowchik等设计了一个针对Cat B的阿霉素前体药物PDOX,其结构式为Ac-Phe-Lys-PABC-DOX, PABC的作用是为了增加DOX和Phe-Lys的空间距离,以利于Phe-Lys与Cat B的接触。在血循环和正常组织中,几乎无Cat B的表达,前体药物以非活性存在；当药物进入肿瘤等富含Cat B的组织时,Phe-Lys二肽被Cat B裂解,暴露的PABC部分可迅速自行水解,释放出活性的DOX,因此药物对富含Cat B的癌组织具有靶向性,而对正常组织的毒副作用减轻。 本课题组先前用新药PDOX治疗胃腹膜转移癌的动物模型研究中,发现PDOX对抗癌转移有明显的疗效,为了验证PDOX对肝癌的治疗效果,我们设计了PDOX治疗高转移性肝癌裸鼠原位移植模型的实验。
第一部分：PDOX对高转移性肝癌裸鼠原位移植模型的疗效研究 目的：比较PDOX与DOX对高转移性肝癌裸鼠原位移植模型的疗效。方法：在细胞培养室将HCCLM9细胞培养至对数生长期,收集细胞后,取适量注射入2只裸鼠肩部皮下,当肿瘤生长至1cm左右时,手术取出皮下种植瘤,将肿瘤切成1mm3,手术植入33只雄性裸鼠肝脏。术后观察裸鼠伤口和肿瘤生长情况。在第8天,裸鼠被随机分为三组,分别为Control组10只、DOX组11只和PDOX组12只,通过尾静脉注射分别给予等体积的生理盐水、DOX和PDOX,每8天给1次药,每4天称1次体重,在实验终点,全部裸鼠行腹部MRI检查,后行安乐死,取血标本行肿瘤标志物AFP检查；解剖裸鼠,详细记录解剖所见,测量肝脏肿瘤重量和体积,计算荷瘤比,按ePCI评分标准进行评分；对各主要组织和脏器行组织病理学检查,观察肺转移和其他转移情况。结果：至实验终点,PDOX组和DOX组动物体重均有轻微的下降,但PDOX组较DOX组小鼠一般状况更好；从D30至D36,由于肝肿瘤负荷过重和腹水,导致对照组体重上升。在实验终点,所有裸鼠行腹部MRI检查以获得代表性的影像。与对照组比较,PDOX和DOX治疗组肿瘤重量分别降低了43.6%和42.0%,同时肿瘤体积分别缩小了53.4%和49.1%(P<0.05)：与对照组相比,PDOX组血小板最高(1.67倍,P<0.05),其次为DOX组(1.59倍,P<0.05)；红细胞和血红蛋白在3组间没有统计学差异。在肝功能指标中,与对照组比较,DOX和PDOX组GGT和AST水平均显著降低(P<0.05),但PDOX组Ca2+显著高于DOX组和对照组(P0.05)；VEGF和E-cadherin的阳性表达率在3组间均无统计学差异(P>0.05)；D2-40中位微淋巴管密度值在对照组、DOX组和PDOX组分别为0.5(0.0-3.2)、1.8(0.0-8.4)和1.8(0.0-5.8),3组无统计学差异(P>0.