方法 采用MTT法检测不同作用浓度的粉防己碱对SKOV3细胞活力的影响。采用吖啶橙染色法观察粉防己碱对SKOV3细胞中自噬溶酶体形成的影响。Western blot法检测粉防己碱处理前后SKOV3细胞自噬相关蛋白LC3的表达情况及相关信号通路的变化。最后,采用MTT法检测粉防己碱单用及联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对SKOV3细胞活力的影响。结果 粉防己碱可点击此处显著抑制SKOV3细胞的活力(P<0.01),作用24 h其半数抑制浓度为15.21μmol/L。吖啶橙染色结果显示,粉防己碱明显促进SKOV3细胞中自噬溶酶体的生成。Western blot实验结果显示,粉防己碱干预后,SKOV3细胞中LC3-Ⅱ和P62蛋白的表达水平明显上调;同时,粉防己碱能明显降低PI3K/AKT/mTOR信号通路中p-GSK2879552分子量mTOR和p-AKT蛋白的水平(P<0.01)。自噬抑制剂3-MA增强了粉防己碱对SKOV3细胞活力的抑制作用。结论 粉防己碱可通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导卵巢癌SKOV3细胞自噬,同时,自噬活化参与了粉防己碱对SKOV3细胞生长的抑制作用。
目的 观察芒柄花黄素对卵巢癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响,并初步探讨其机制确认细节。方法 体外培养人卵巢浆液性囊腺癌SKOV-3细胞,采用不同浓度(0、25、50和100μmol/L)芒柄花黄素处理细胞48 h,用MTS法检测细胞活力,并筛选出半数抑制浓度。通过划痕迁移实验和Transwell侵袭实验检测芒柄花黄素对SKOV-3细胞迁移与侵袭能力的影响。RT-qPCR法和Western blot法检测细胞中的上皮钙黏素(E-cadherin)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA及蛋白表达的变化。