9%、13.8%及23.9%。BMI越高,年龄越大糖尿病、高血压患病的相对危险度越高。 (二) 动物模型研究: 1. MS组体重、Lee’s指数和腹围显著高于对照组,表现出腹型肥胖体型。 2. MS组大鼠的WAT重量、VAT总量及其内脏脂肪系数均显著高于对照组,各部位WAT细胞的面积、大脂肪细胞数量均明显高于对照组。 3. MS组大鼠血压、FINS、LDL和TG、FFA均明显高于对照组。 病理切片可见,MS组大鼠BAT结构松散;棕色脂肪细胞内脂滴增大、增多。肝组织,部分肝细胞脂肪变性,肝板结构消失。

(三) 分子生物学实验: 1. MS肥胖大鼠脂肪组织中AGT mRNA的表达:皮下脂肪组织(Sub)中AGT mRNA的表达明显低于对照组,而BAT、VAT中AGT mRNA的表达均显著高于对照组。 2. MS肥胖大鼠脂肪组织中肾素mRNA的表达:BAT中mRNA的表达明显低于对照组而Sub中mRNA的表达显著高于对照组,VAT中与对照组无显著性差异。 3. MS肥胖大鼠脂肪组织中ACE mRNA的表达:在Sub中表达明显低于对照组,而BAT和VAT中ACE mRNA的表达均显著高于对照组。 4. MS肥胖大鼠脂肪组织中AT1 mRNA和蛋白表达:在BAT中AT1 mRNA和蛋白表达明显低于对照组,VAT中AT1 信号通路 mRNA和蛋白表达均显著高于对照组,而Sub中AT1 mRNA的表达高于对照组,AT1蛋白的表达与对照组无显著性差异。 5. MS肥胖大鼠脂肪组织中ACE2及AT2 mRNA的表达:在MS肥胖大鼠和对照组大鼠中,各部位脂肪组织均未发现ACE2及AT2 PARP抑制剂 mRNA的表达。 6. MS肥胖大鼠脂肪?
从我们的大规模cDNA克隆和测序计划中,利用表达谱基因芯片筛选的结果并通过生物信息学分析,我们选取了2条基因进行进一步的研究,以探讨这些基因的功能。 外界刺激通过细胞内的蛋白激酶反应链,将信号从细胞膜传导到核,导致相关转录因子的磷酸化和被激活,从而引起基因表达的变化。cAMP反应元件结合蛋白(cAMP-responsive element binding protein,CREB)也许是其中最具特点的刺激诱导转录因子我们实验室克隆了一个人类CREB的新基因(CREB4),该基因编码一个395个氨基酸的蛋白,并与小鼠的CREB3高度同源。RT-PCR显示CREB4在胰腺、前列腺、脑和骨骼肌组织中表达,在小肠、外周血白细胞、睾丸和胸腺组织中低表达,而在成人胎盘、心脏、脾脏、卵巢、肾脏、肝脏、肺和结肠组织中未检测到特异性条带,在检测的各肿瘤组织中显示CREB4基因只在结肠癌

(CX-1和GI-112)、肺癌(LX-1)、前列腺癌(PC-3)和胰腺癌(GI-103)有表达,而在乳腺癌(GI-101)、卵巢癌组织(GI-102)和肺癌组织(GI-117)中未测到特异性条带。通过生物信息学将CREB4定位于人染色体1q21.3。表达谱芯片结果显示CREB4基因在肝癌组织上调。GFP荧光定位显示全长CREB4定位与细胞质内,而去C端的突变体定位与细胞核。采用酵母双杂交系统以寻找与CREB4相互作用的蛋白。我们发现CREB4可以与核孔复合物相关蛋白TPR及kayopherinα2相互作用,而这两个蛋白都与蛋白质的核转运有关,推测CREB4可能通过它们进入细胞核。 蛋白4.1是红细胞中以血影蛋白(spectrin)为基础的细胞膜骨架的一个基本成分,在维持红细胞质膜的形态和机械性能方面起着至关重要的作用。我们克隆了一个新的蛋白4.1基因(4.1O)。该基因全长2312bp,编码一个553氨基酸的蛋白。RT-PCR显示4.1O只在

卵巢组织中检测到特异性条带,在胎胸腺组织和胎脑组织中低表达。生物信息学分析显示4.1O含有14个外显子和13个内含子,定位于人染色体9q21-9q22区段上。表达谱芯片结果提示4.1O基因在肝癌组织和胃癌组织中表达上调。
第一部分 Staurosporine小白鼠 榄香烯在喉癌化疗中作用机制的体外研究 目的:探讨榄香烯对人喉鳞癌细胞株 HEp-2 细胞和 AMC-HN-8 细胞的抑制作用; 以及与凋亡相关的 Caspase-3 活性的改变;探讨榄香烯抑制人喉癌细胞株过程中 真核细胞翻译起始因子 eIF 家族成员(eIF4E、eIF4G)与肿瘤新生血管有关的 bFGF、VEGF 的表达情况。方法:使用 MTT 法和流式细胞分析技术(FCM), 研究榄香烯诱导人喉癌细胞株凋亡的作用;并使用比色法,研究榄香烯诱导人喉 鳞癌细胞株凋亡时 Caspase-3 活性的变化;以及使用 Westernblot 和 RT-PCR 法检 测榄香烯作用的人喉癌细胞株中 eIF4E、eIF4G、bFGF、VEGF 在 mRNA 和蛋白 水平的表达。结果:榄香烯抑制人喉癌细胞株 HEp-2 细胞和 AMC-HN-8 细胞有 时间剂量依赖性(HEp-2 细胞 24 小时 IC50值为 69.297μg/ml,AMC-HN-8 细胞 24 小时 IC50值为 70.